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發(fā)布時(shí)間：2022-08-16 22:17:03 作者：知網(wǎng)小編 來源：educationmanagementsystem.com
RT-PCR技術(shù)靈敏而且用途廣泛，可用檢測(cè)細(xì)胞、組織中基因表達(dá)水平，細(xì)胞中RNA病毒的含量和直接克隆特點(diǎn)基因的cDNA序列等。 如果用于定量檢測(cè)，就是上文提到的qPCR， 此次新冠病毒核酸檢測(cè)熒光PCR技術(shù)，就是基于此。
新冠疾病作為一種高傳染性疾病，對(duì)其病原體的檢測(cè)是診療病人的關(guān)鍵。 目前檢測(cè)傳染病的策略包括兩點(diǎn)，檢測(cè)病原體本身，或檢測(cè)人體為了抵抗病原體而產(chǎn)生的抗體，也就是病原學(xué)檢測(cè)和血清學(xué)檢測(cè)。 例如，在冠狀病毒中，針對(duì)其刺突糖蛋白，包膜蛋白和核衣殼蛋白的檢測(cè)，就屬于病原學(xué)檢測(cè)中的抗原檢測(cè)；而針對(duì)其基因組RNA的檢測(cè)則是病原學(xué)中的核酸檢測(cè)。 病毒入侵人體，一般會(huì)激活機(jī)體的特異性免疫，產(chǎn)生抗體進(jìn)行抵御，針對(duì)這些特異抗體的檢測(cè)則屬于血清學(xué)檢測(cè)。 這里我們從分子生物學(xué)的角度，將上述檢測(cè)類型重新分成核酸檢測(cè)和蛋白檢測(cè)（表1）。 不過這里要注意的是，抗原不一定都是抗體，細(xì)菌上的脂多糖LPS就不是蛋白。 檢測(cè)方法上，我們將介紹qPCR、等溫?cái)U(kuò)增和基于CRISPR的三種核酸檢測(cè)技術(shù)。
基于抗體與抗原的特異性識(shí)別反應(yīng)，目前已經(jīng)開放了一系列免疫檢測(cè)方法，最常見的如Western blot；臨床上則多采用膠體金檢測(cè)試紙。 目前已經(jīng)有針對(duì)新型冠狀病毒特異IgM和IgG的檢測(cè)試紙，用于進(jìn)一步確認(rèn)病人的感染情況。
目前針對(duì)新型冠狀病毒的檢測(cè)主要是采用的是qPCR (Real time quantitative PCR, 實(shí)時(shí)熒光定量PCR）中的Taqman水解探針法。 2020年1月21日，中國(guó)疾控中心提供的用于新型冠狀病毒核酸檢測(cè)的引物和探針序列（圖3）。
